مزلسون و استال
سه طرح پیشنهادی برای همانندسازیDNA: همانندسازی حفاظتی ، نیمه حفاظتی و غیر حفاظتی.
کدام طرح مورد تایید قرار گرفته است؟
شرح آزمایش : سلول های Ecoli در محیط کشت حاوی N15(ایزوتوپ سنگین ) کشت و نشاندار شدند.بعد این سلول ها به محیط دیگر که حاوی N14(ایزوتوپ سبک) انتقال و کشت و نشاندار شدند.
هر از گاهی نمونه هایی از محیط کشت برداشته و با سانترفیوژ و براساس شیب غلظت بررسی می شدند.(جدایی براساس چگالی).
در این آزمایش باند هایی سنگین_سنگین، سنگین _سبک، و سبک _سبک بوجود اومد.
این آزمایش جهت اثبات همانندسازی نیمه حفاظتیDNAبود. و بعد از چندین نسل تمامDNAهای خارج شده از سلول ها چگالی سنگین_سبک را داشتند،یعنیDNAجدید حاوی یک رشته قدیمی مادری و یک رشته جدید دختری است.
نکات حائز اهمیت: روش حفاظتی DNAهرگز رشتهL_H ازDNAتولید نمی کند.
روش نیمه حفاظتی هم هرگز رشته H_H ایجاد نمی کند.
جمع بندی مطالب:
اگر همانندسازی به روش حفاظت شده صحیح می بود باید در ۲۰ دقیقه اول بعد از همانندسازی در دستگاه سانتریفوژ دو نوار یکی سبک و دیگری سنگین تشکیل میشد که نشد (یک نوار تشکیل شده بود ) پس نتیجه اینکه همانند سازی DNAبه روش حفظ شده نیست.
اگر همانند سازی به روش نیمه حفاظتی شده ویا غیر حفاظتی درست باشد بعد از ۲۰ دقیقه (دور اول همانند سازی) باید یک نوار تشکیل شود .
تا اینجا این دو مدل قبول است.
اگر همانند سازی نیمه حفظ شده درست باشد بعد از ۴۰ دقیقه (دور دوم همانند سازی) باید دو نوار در سانتریفیوژ داشته باشیم . یکی سبک و دیگری متوسط. ودقیقا همین طور شد.
اگر همانند سازی غیر حفاظتی درست باشد باید بعد از دور دوم همانند سازی هم باز یک نوار داشته باشیم که چنین نشد.